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非选择题1.(15[文]分，除标注外，每空[章]2分)(1)多(2[来])磷酸二酯键DNA[自]连接酶(3)A、B[知]、D(4分)(4)[嘛]①生长素和细胞分裂[答]素(3分)【解析】[案](1)DNA分子中[网]A一T之间有2个氢[文]键，G一C之间有三[章]个氢键，故该结构中[来]碱基对A一T的比例[自]多，DNA分子不稳[知]定，利于DNA分子[嘛]的解螺旋。(2)限[答]制酶切割的是DNA[案]分子中特定部位的两[网]个脱氧核苷酸之间的[文]磷酸二酯键；基因表[章]达载体的构建除限制[来]酶参与外，还需要D[自]NA连接酶的参与。[知](3)将上述切开的[嘛]质粒与目的基因混合[答]，加入DNA连接酶[案]连接后，导人受体细[网]胞的可能有重组质粒[文]或不含目的基因的质[章]粒或不含有质粒。B[来]amH I和Sa3AI都会[自]破坏质粒上的Y抗性[知]基因。若受体细胞含[嘛]有不含目的基因的质[答]粒，不含目的基因的[案]质粒上含有X和Y抗[网]生素抗性基因，故受[文]体细胞可能抗X和抗[章]Y;若受体细胞含有[来]重组质粒，重组质粒[自]含有X抗生素抗性基[知]因，所以受体细胞可[嘛]能抗X而对Y敏感（[答]不抗Y);如果受体[案]细胞不含有质粒，受[网]体细胞两种抗性都没[文]有。故选A、B、D[章]项。(4)图3中①[来]将目的基因导入受体[自]细胞，发生了基因重[知]组，故基因重组发生[嘛]在图3中①；图3过[答]程②、③表示的是植[案]物组织培养过程，该[网]过程中需要调控好生[文]长素和细胞分裂素的[章]比例，两者用量的比[来]例影响植物细胞的发[自]育方向。
2.(15分，除标[知]注外，每空2分)([嘛]1)T4DNA连接[答]酶(1分)(2)P[案]CR Tag酶（热稳定D[网]NA聚合酶）构建基[文]因表达载体与Eco[章]R I切割产生的DNA[来]片段末端相同(3)[自]T-DNA Ti质粒上只有T-[知]DNA片段能够整合[嘛]到受体细胞的染色体[答]上分子杂交技术中账[案]合【解析】(1)基[网]因工程中，构建基因[文]表达载体时需要使用[章]限制酶和DNA连接[来]酶，DNA连接酶中[自]的TDNA连接酶既[知]可以连接黏性末端，[嘛]又可以连接平末端。[答](2)利用PCR技[案]术可以在短时间内获[网]得大量的目的基因，[文]需要热稳定DNA聚[章]合酶(Taq酶)的[来]催化，基因工程的核[自]心步骤是构建基因表[知]达载体；根据题意分[嘛]析，质粒运载体用E[答]coR I切割，而另一种酶[案]也可以，则该酶与E[网]coR I切割产生的DNA[文]片段末端相同。(3[章])利用农杆菌转化法[来]将目的基因导入植物[自]细胞，由于农杆菌的[知]Ti质粒上只有T-[嘛]DNA片段能够整合[答]到受体细胞的染色体[案]上，所以构建重组质[网]粒时，应该将目的基[文]因和标记基因都插入[章]质粒的T-DNA片[来]段内；检测目的基因[自]表达产生的mRNA[知]应该用分子杂交技术[嘛]。
